რამდენი დნმ-ის ასლი არსებობს PCR-ის 10 ციკლის შემდეგ?

2024 ავტორი: Miles Stephen | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-15 23:37

პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია (PCR)

ორჯაჭვიანი დნმ-ის ნაწილაკების რაოდენობა ორმაგდება თითოეულ ციკლში, ასე რომ n ციკლის შემდეგ გექნებათ დნმ-ის 2^n (2-დან n:th ხარისხამდე) ასლი. მაგალითად, 10 ციკლის შემდეგ გაქვთ 1024 ეგზემპლარი , 20 ციკლის შემდეგ გაქვთ დაახლოებით ერთი მილიონი ეგზემპლარი და ა.შ.

ანალოგიურად, ისმის კითხვა, რამდენი დნმ-ის ასლი არსებობს PCR-ის 30 ციკლის შემდეგ?

30 ციკლის შემდეგ , რაც დაიწყო როგორც ერთი მოლეკულა დნმ გაძლიერდა მილიარდზე მეტი ასლები (2 ³⁰ = 1.02 x 10⁹).

დნმ-ის ნიმუშის რამდენი ასლი იწარმოება PCR ტექნიკით 6 ციკლის შემდეგ? შემდეგ ერთის დასრულება ციკლი , 2 ასლები არიან წარმოებული ერთიდან დნმ სეგმენტი. შემდეგ მეორის დასრულება ციკლი , 22 = 4 ასლები არიან წარმოებული . ანალოგიურად, შემდეგ nth ციკლი , 22 ასლები არიან წარმოებული , სადაც n არის რიცხვი ციკლები . აქედან გამომდინარე, შემდეგ დასრულება 6 ციკლი , 2 6 = 64 ასლები იქნება წარმოებული.

ანალოგიურად, ადამიანები კითხულობენ, რამდენი ციკლი სჭირდება დნმ-ის სეგმენტის ერთი მილიარდი ასლის შექმნას?

ციკლების რაოდენობა ეს ჩვეულებრივ ხდება ~-ის შემდეგ 30 ციკლი PCR-ებში, რომლებიც შეიცავს სამიზნე თანმიმდევრობის ~105 ასლს და Taq დნმ პოლიმერაზას (ეფექტურობა~0,7). სულ მცირე 25 ციკლია საჭირო ძუძუმწოვრების დნმ-ის შაბლონებში ერთი ასლის სამიზნე თანმიმდევრობების გაძლიერების მისაღები დონის მისაღწევად.

როგორ გამოვთვალოთ ციკლების რაოდენობა PCR-ში?

1 პასუხი. ყოველი რაუნდით PCR , თქვენი ნიმუში გაორმაგდება (იდეალურად) და თქვენ მართალი ხართ 2n-ის გამოყენებისას გაანგარიშება The თანხა წარმოებული დნმ-ის. უბრალოდ შეცვალეთ X0 და Xn მნიშვნელობები - 10ng და 1000ng. პასუხი იქნება ~ 6.64 ციკლები.