Სარჩევი:
ვიდეო: როგორ იტვირთება გელის ელექტროფორეზი?
2024 ავტორი: Miles Stephen | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-15 23:37
ნიმუშების ჩატვირთვა და აგაროზის გელის გაშვება:
- დამატება ჩატვირთვა ბუფერი თქვენი დნმ-ის თითოეული ნიმუშისთვის.
- გამაგრების შემდეგ მოათავსეთ აგაროზა ლარი შევიდა ლარი ყუთი ( ელექტროფორეზი ერთეული).
- შეავსეთ ლარი ყუთი 1xTAE (ან TBE) სანამ ლარი დაფარულია.
- ფრთხილად დატვირთვა მოლეკულური წონის კიბე პირველ შესახვევში ლარი .
ამასთან დაკავშირებით, რამდენი დნმ გჭირდებათ ჩატვირთვა გელის ელექტროფორეზისთვის?
ოდენობა დნმ ჩატვირთვა თითო ჭაბურღილი ცვალებადია. ყველაზე მცირე რაოდენობით დნმ რომელიც შეიძლება გამოვლინდეს ეთიდუ ბრომიდით არის 10 ნგ. დნმ 100 ნგ-მდე ოდენობა თითო ჭაბურღილზე გამოიწვევს მკვეთრ, სუფთა ზოლს შეღებილ ეთიდიუმის ბრომიდზე ლარი.
დამატებით, რატომ გამოიყენება ბუფერი გელის ელექტროფორეზის დროს წყლის ნაცვლად? The ბუფერი საჭიროა დნმ-ის ხსნარის pH-ის შესანარჩუნებლად ნეიტრალურ დონეზე, რადგან თუ ის შეიძლება გახდეს მჟავე ელექტროლიზის გზით. ელექტროდების მიერ გამოწვეულმა ელექტრული დენები შეიძლება გამოიწვიოს წყალი მოლეკულები H+ იონების დისოცირებისთვის და გასათავისუფლებლად.
ხალხი ასევე იკითხავს, რატომ გამოიყენება მარკერი გელის ელექტროფორეზის დროს?
მცირე ფრაგმენტები უფრო სწრაფად მოძრაობენ და, შესაბამისად, უფრო შორს, ვიდრე უფრო დიდი ფრაგმენტები, როდესაც ისინი გველის გავლით ლარი . რატომ გამოიყენება მარკერი ფრაგმენტების მეშვეობით გაშვებისას ლარი ? ა მარკერი შეიცავს ცნობილი ზომის დნმ-ის ფრაგმენტებს. მარკერები იმართება ყველა ლარი სხვა უცნობ ფრაგმენტებთან შედარებისთვის ლარი ბილიკები.
რამდენი დნმ ჩანს აგაროზის გელზე?
ყველაზე აგაროზის გელები მზადდება 0.7%-დან 2%-მდე. 0.7% ლარი ნება აჩვენეთ დიდის კარგი განცალკევება (გარჩევადობა). დნმ ფრაგმენტები (5-10 კბ) და 2% ლარი ნება აჩვენეთ კარგი გარჩევადობა მცირე ფრაგმენტებისთვის (0,2–1 კბ).
გირჩევთ:
როგორ იტვირთება ნიმუში სვეტის ქრომატოგრაფიაში?
სვეტის ჩასატვირთად: გახსენით ნიმუში გამხსნელის მინიმალურ რაოდენობაში (5–10 წვეთი). პიპეტის ან შპრიცის გამოყენებით სქელი ნემსით, დაასხით ნიმუში პირდაპირ სილიციუმის ზემოდან. მას შემდეგ, რაც მთლიანი ნიმუში დაემატება, ნება მიეცით სვეტს გადინება ისე, რომ გამხსნელის დონე შეეხოს სილიციუმის ზედა ნაწილს
რატომ მოთავსდა დადებითი ელექტროდი გელის ბოლოში?
დნმ-ის ნიმუშები იტვირთება ჭებში გელის უარყოფითი ელექტროდის ბოლოს. დენი ჩართულია და დნმ-ის ფრაგმენტები მიგრირებს გელის მეშვეობით (დადებითი ელექტროდისკენ). ყველაზე დიდი ფრაგმენტები გელის ზედა ნაწილთანაა (უარყოფითი ელექტროდი, საიდანაც დაიწყო), ხოლო ყველაზე პატარა ფრაგმენტები ბოლოში (დადებითი ელექტროდი)
რა არის გელის ელექტროფორეზის მიზანი?
ძირითადი პუნქტები: გელის ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება დნმ-ის ფრაგმენტების განცალკევებისთვის მათი ზომის მიხედვით. დნმ-ის ნიმუშები იტვირთება ჭაბურღილებში (ჩაღრმავებში) გელის ერთ ბოლოში და ელექტრული დენი გამოიყენება მათ გელის გავლით. დნმ-ის ფრაგმენტები უარყოფითად არის დამუხტული, ამიტომ ისინი მოძრაობენ დადებითი ელექტროდისკენ
რა ფაქტორს იყენებს გელის ელექტროფორეზი დნმ-ის მოლეკულების კვიზლეტის გამოსაყოფად?
გელი მოქმედებს როგორც საცერი, ჰყოფს სხვადასხვა დნმ-ის მოლეკულებს მათი ზომის მიხედვით, რადგან დნმ-ის მცირე მოლეკულები შეძლებენ გელში უფრო სწრაფად გადაადგილებას, ვიდრე უფრო დიდ მოლეკულებს. გელში შემავალი ქიმიკატი, რომელსაც დნმ გადის, უკავშირდება დნმ-ს და ჩანს ულტრაიისფერი შუქის ქვეშ
რა არის დადებითი და უარყოფითი კონტროლი გელის ელექტროფორეზის დროს?
დადებითი და უარყოფითი კონტროლი არის ნიმუშები, რომლებიც გამოიყენება გელის ელექტროფორეზის ექსპერიმენტის ნამდვილობის დასადასტურებლად. პოზიტიური კონტროლი არის ნიმუშები, რომლებიც შეიცავს დნმ-ის ან ცილის ცნობილ ფრაგმენტებს და კონკრეტული გზით გადაადგილდებიან გელზე. უარყოფითი კონტროლი არის ნიმუში, რომელიც არ შეიცავს დნმ-ს ან პროტეინს