რა არის ლიზოზიმის ფერმენტის აქტივობის ანალიზი?

2024 ავტორი: Miles Stephen | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-15 23:37

Სტანდარტი ანალიზი შესამოწმებლად ფერმენტული აქტივობა დან ლიზოზიმი არის სიმღვრივის შემცირება ანალიზი . აქ, Micrococcus lysodeikticus ხსნარის OD-ის შემცირება 450 ნმ-ზე იზომება დროთა განმავლობაში. თუმცა, ლიტერატურაში, ფერმენტული აქტივობა მსგავსი ფერმენტები ხშირად იზომება 600 ნმ.

შემდეგ, როგორ იზომება ლიზოზიმის აქტივობა?

ლიზოზიმის აქტივობა არის მოზომილი OD 450-ზე ოპტიკური სიმკვრივის შემცირების თვალყურის დევნით, რადგან სუბსტრატის უჯრედის კედელი იშლება ფერმენტის მიერ, თუ ის არსებობს. სწრაფად დაამატეთ 0,1 მლ ლიზოზიმი აურიეთ კუვეტის შებრუნებით და დაუყოვნებლივ მოათავსეთ იგი სპექტროფოტომეტრში.

ანალოგიურად, როგორ გამოვთვალოთ ფერმენტის აქტივობა? ფერმენტის აქტივობა = სუბსტრატის მოლი გარდაიქმნება დროის ერთეულზე = სიჩქარე × რეაქციის მოცულობა. ფერმენტის აქტივობა არის საზომი აქტიურის რაოდენობით ფერმენტი არსებობს და, შესაბამისად, დამოკიდებულია პირობებზე, რომელიც უნდა იყოს მითითებული. SI ერთეული არის კატალი, 1 კატა = 1 მოლი ს⁻¹, მაგრამ ეს არის ზედმეტად დიდი ერთეული.

აქედან გამომდინარე, რა არის ლიზოზიმის აქტივობა?

ლიზოზიმი არის გლიკოზიდის ჰიდროლაზა, რომელიც კატალიზებს 1,4-ბეტა-კავშირების ჰიდროლიზს პეპტიდოგლიკანში N-აცეტილმურამის მჟავასა და N-აცეტილ-D-გლუკოზამინის ნარჩენებს შორის, რომელიც არის გრამდადებითი ბაქტერიული უჯრედის კედლის ძირითადი კომპონენტი. ქათმის კვერცხის ცილა ლიზოზიმი ინარჩუნებს თავის აქტივობა pH-ის დიდ დიაპაზონში (6-9).

როგორ ანგრევს ლიზოზიმი ბაქტერიის უჯრედის კედლებს?

ლიზოზიმი არის ფერმენტი, რომელიც არღვევს პეპტიდოგლიკანს ბაქტერიული უჯრედის კედლები NAM და NAG საქარიდებს შორის β-(1, 4) კავშირების ჰიდროლიზის კატალიზაციით (ნახ.