ვიდეო: არსებობს სხვა მეთოდები PCR პროდუქტების გასაწმენდად?
2024 ავტორი: Miles Stephen | [email protected]. ბოლოს შეცვლილი: 2023-12-15 23:37
იმ აპლიკაციებისთვის, რომლებიც საჭიროებენ PCR გაწმენდა ან დადასტურება PCR შედეგები, იქ არიან ორი მეთოდები ზოგადად მოჰყვა: PCR პროდუქტი იზოლაცია სვეტის და გელის გამოყენებით განწმენდა აგაროზის გელისგან.
აქ რა ტიპის ქრომატოგრაფია გამოიყენება PCR პროდუქტების გასაწმენდად?
PCR პროდუქტების გასაწმენდად გამოიყენება ზომის გამორიცხვის ქრომატოგრაფია. ეს იჭერს მცირე მოლეკულებს, როგორიცაა პროტეინი, პრაიმერები , და ნუკლეოტიდები, ხოლო დიდი მოლეკულები, როგორიცაა PCR პროდუქტები, ძალიან დიდია იმისათვის, რომ შევიდნენ მძივებში და გადავიდნენ სვეტის მეშვეობით შეგროვების მილებში.
ასევე, როგორ ასუფთავებთ დნმ-ს? ძირითადად, შეგიძლია განწმენდა შენი დნმ ნიმუშები თქვენი უჯრედის და/ან ქსოვილის ნიმუშების ლიზირებით ყველაზე შესაფერისი პროცედურის გამოყენებით (მექანიკური დარღვევა, ქიმიური დამუშავება ან ფერმენტული მონელება), ნუკლეინის მჟავების იზოლირება მისი დამაბინძურებლებისგან და მისი დალექვა შესაფერის ბუფერულ ხსნარში.
გარდა ამისა, რატომ ვასუფთავებთ PCR პროდუქტს?
განწმენდა დნმ-ის ა PCR რეაქცია, როგორც წესი, აუცილებელია ქვედა დინების გამოყენებისთვის და ხელს უწყობს ფერმენტების, ნუკლეოტიდების, პრაიმერების და ბუფერული კომპონენტების მოცილებას. საყოველთაოდ გამოყენებული მეთოდები იყენებს სპინის სვეტებს, რომლებიც შეიცავს სილიციუმის მატრიქსს, რომლებთანაც დნმ შეიძლება შერჩევით იყოს შეკრული ქაოტროპული მარილების არსებობისას.
რატომ უნდა გაიწმინდოს დნმ?
ჩვენ სუფთა ზევით დნმ წყალხსნარებიდან ბუფერული მარილების, ფერმენტების ან სხვა ნივთიერებების მოსაშორებლად, რომლებმაც შეიძლება გავლენა მოახდინონ ქვემოთ მოყვანილ აპლიკაციებზე. მაგალითები მოიცავს PCR რეაქციას სუფთა ზევით, სუფთა მდე შეზღუდვის შემდეგ digests და სუფთა გენომური ან პლაზმიდური დნმ დაბინძურებულია უჯრედული ცილებით/ნამსხვრევებით.
გირჩევთ:
რამდენი დნმ-ის ასლი არსებობს PCR-ის 10 ციკლის შემდეგ?
პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია (PCR) ორჯაჭვიანი დნმ-ის ნაწილაკების რაოდენობა ორმაგდება თითოეულ ციკლში, ასე რომ n ციკლის შემდეგ თქვენ გაქვთ დნმ-ის 2^n (2-დან n:th ხარისხამდე) ასლი. მაგალითად, 10 ციკლის შემდეგ თქვენ გაქვთ 1024 ასლი, 20 ციკლის შემდეგ გაქვთ დაახლოებით ერთი მილიონი ასლი და ა.შ
როგორ ამზადებთ გაწმენდილ წყალს ფანჯრების გასაწმენდად?
როგორ დავამზადოთ სუფთა წყალი ფანჯრის გასაწმენდად 1) გამოიყენეთ უკუ ოსმოსის მეთოდი ონკანის წყლის გასაფილტრად. 2) გააგზავნეთ გაფილტრული წყალი DI ფისოვანი ჭურჭლის მეშვეობით. 3) გამოსცადეთ დეიონირებული წყალი TDS (სულ გახსნილი მყარი ნივთიერებების) მრიცხველით. 4) დასრულებული წყალი გადაისვით გასასუფთავებელ ფანჯარაში
რატომ გამოიყენება სუბლიმაცია კოფეინის გასაწმენდად?
პროდუქტს, რომელიც მოპოვების შემდეგ გროვდება, ჯერ კიდევ ბევრი მინარევებია. სუბლიმაცია ნიმუშის გაწმენდის ერთ-ერთი გზაა, რადგან კოფეინს აქვს უნარი გადავიდეს მყარიდან პირდაპირ ორთქლზე და უკუღმა წარმოქმნას მყარი, თხევადი ფაზის გარეშე
რა არის რეაგენტებისა და პროდუქტების განმარტება?
რეაქტიული ნივთიერებები: ნივთიერებებს, რომლებიც მონაწილეობენ ქიმიურ რეაქციაში, ეწოდება რეაგენტები. პროდუქტები: ნივთიერებებს, რომლებიც წარმოიქმნება რეაგენტებს შორის ქიმიური რეაქციით, ეწოდება პროდუქტები
როგორ გამოიყენება სუბლიმაცია ნივთიერების გასაწმენდად?
სუბლიმაცია არის ტექნიკა, რომელსაც იყენებენ ქიმიკოსები ნაერთების გასაწმენდად. მყარი, როგორც წესი, მოთავსებულია სუბლიმაციის აპარატში და თბება ვაკუუმში. ამ შემცირებული წნევის ქვეშ, მყარი აორთქლდება და კონდენსირდება, როგორც გაწმენდილი ნაერთი გაცივებულ ზედაპირზე (ცივ თითზე), რის შედეგადაც ტოვებს მინარევების არაასტაბილურ ნარჩენებს