რა არის PCR პროდუქტის გაწმენდის მიზანი?
რა არის PCR პროდუქტის გაწმენდის მიზანი?

ვიდეო: რა არის PCR პროდუქტის გაწმენდის მიზანი?

ვიდეო: რა არის PCR პროდუქტის გაწმენდის მიზანი?
ვიდეო: რა არის კარმა და როგორ მოქმედებს ის? 2024, დეკემბერი
Anonim

განწმენდა დნმ-ის ა PCR რეაქცია, როგორც წესი, აუცილებელია ქვედა დინების გამოყენებისთვის და ხელს უწყობს ფერმენტების, ნუკლეოტიდების, პრაიმერების და ბუფერული კომპონენტების მოცილებას. ტრადიციულად ეს ხდებოდა ორგანული მოპოვების მეთოდების გამოყენებით, როგორიცაა ფენოლის ქლოროფორმის მოპოვება, რასაც მოჰყვა ეთანოლის ნალექი.

ასევე საკითხავია, რატომ არის საჭირო PCR პროდუქტების გაწმენდა?

Შენ უნდა PCR პროდუქტების გაწმენდა გამოუყენებელი პრაიმერების, ნუკლეოტიდების და ფერმენტების მოშორება ლიგაციის წარმატების ოპტიმიზაციის მიზნით, რომელიც შეინარჩუნებს და თანმიმდევრობას პროდუქტი დან PCR . რომ განწმენდა The PCR პროდუქტები , გამოიყენება ზომის გამორიცხვის ქრომატოგრაფია.

გარდა ამისა, რა უნდა გავაკეთო PCR-ის შემდეგ? მაქსიმალური აღდგენის მიზნით, ჩამოიბანეთ შეკავებული ჭიქა ორჯერ 10-დან 20 μL TE ან წყლით. Ფინალი PCR რეაქცია შეიძლება შეიცავდეს მიკროგრამამდე გაძლიერებულ დნმ-ს, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას მოლეკულური ბიოლოგიის სხვადასხვა აპლიკაციისთვის. ეს აპლიკაციები შეიძლება იყოს მეტ-ნაკლებად მგრძნობიარე ნარჩენი კომპონენტების მიმართ PCR რეაქციის ნაზავი.

შეიძლება ასევე იკითხოთ, როგორ ასუფთავებთ PCR პროდუქტებს?

გამოიყენება კლასიკური მეთოდები სუფთა ზევით PCR პროდუქტები თანმიმდევრობის დაწყებამდე მოიცავს გელის ელექტროფორეზის, ეთანოლის დალექვას და სვეტის ქრომატოგრაფიას. მიუხედავად იმისა, რომ საკმაოდ ეფექტურია, ეს მეთოდები შეიძლება სწრაფად გახდეს შრომატევადი მრავალი ნიმუშის პარალელურად დამუშავებისას და აჩვენოს ნიმუშის დაკარგვის სხვადასხვა ხარისხი.

რატომ უნდა გაიწმინდოს დნმ?

ჩვენ სუფთა ზევით დნმ წყალხსნარებიდან ბუფერული მარილების, ფერმენტების ან სხვა ნივთიერებების მოსაშორებლად, რომლებმაც შეიძლება გავლენა მოახდინონ ქვემოთ მოყვანილ აპლიკაციებზე. მაგალითები მოიცავს PCR რეაქციას სუფთა ზევით, სუფთა მდე შეზღუდვის შემდეგ digests და სუფთა გენომური ან პლაზმიდური დნმ დაბინძურებულია უჯრედული ცილებით/ნამსხვრევებით.

გირჩევთ: